InSite™ 沙门氏菌 是一种用于清洗后的食品接触表面和其他加工设备上的沙门氏菌快速检测拭子。培养基颜色从紫色变为亮黄色时表 明沙门氏菌检测结果初步判定为阳性。
科学原理:
InSite™ 沙门氏菌 培养基内含有化的选择剂和代谢底物,可用来选择性培养和鉴别污染样本中的沙门氏菌属。培养基可选择性地培养沙门氏菌,同时限制其它革兰氏阴性菌以及革兰氏阳性菌生长。当培养基内有沙门氏菌生长后,培养基会渐呈酸性;培养基中所含的 pH 指示剂会检测到 pH 值的变化,从而使培养基的颜色从紫色渐变为亮黄色。在 37°C 条件下培养 24 小时后,培养基颜色从紫色变为亮黄色时表明沙门氏菌检测结果初步判定为阳性。
注意:在有些拭子中可能会自然产生沉淀,属于正常现象。为缓解这一现象,可在培养前或培养后轻轻摇动拭子使其溶解。这不会影响检测性能。
所需设备(未提供):
37 ± 1 °C 的培养箱
使用方法:
步骤 1:样本采集和预増菌
1.1 采集样本时,确保应用无菌技术。不要触碰拭子或采样装置的内部。然后紧握拭子管,旋转并将拭子顶部从管中拉出。 拭子头已经预湿过,试管中若有冷凝水珠属正常现象。 在典型的平整表面上充分涂抹一块标准的 30 x 30 厘米 (12 x 12 英寸)的区域。采集样本时应旋转拭子以确保 限度地提取样品,并施加足够的压力使拭子杆弯曲。对于不规则表面,请确保每次检测所使用涂抹方法的一致性,并涂抹足够大的区域以采集具有代表性的样本。
1.2 涂抹完所需检测区域后,将拭子放回拭子管并紧闭装置。
请勿激活检测拭子。
1.3 为得到结果,应在 37 ± 1 °C 下将拭子培养 6 小时。 也可采用其他前増菌时间。参见以下“注意”。
步骤 2:激活和选择性增菌
2.1 将 InSite 沙门氏菌检测拭子从培养箱中取出。要激活拭子,紧握拭子管并用拇指和食指前后弯折球管以折断 Snap-Valve。 挤压球管 3 至 4 次,将所有
液体排入管底。
液体排入管底。
2.2 挤压拭子管 3 次来轻轻按揉管底,然后摇晃 3 秒钟。这有利于细胞从拭子头中释放并排除气泡。
2.3 在 37 ± 1 °C 下培养 18 - 42 小时。观察颜色变化并记录结 果。阳性结果可在样品采集后 24 小时内显示。必须在样品收集 48 小时之后才可考虑做出阴性结果的判断。请参见 “结果说明”。
注意: 改良的前増菌程序
有两种方式可供选择,(a) 将步骤 1.3 省略或 (b) 延长:
a.
若想省略前增菌步骤,可跳过步骤 1.3,按照步骤 2.1 立即激活拭子。省略前增菌步骤可能会降低沙门氏菌检出率,增加假阴性结果的几率。
b.
前増菌时长可超过推荐的 6 小时。但延长前增菌时间可能会增加假阳性几率。
结果说明:
垂直握住拭子管,从标签观察窗查看培养基颜色,并与标签上的比色表进行比对。如果在 37°C 条件下培养 24–48 小时,颜色从紫色变为亮黄色,样品则初步判定为沙门氏菌阳性。
请参见表 1。样品培养 48 小时后颜色无改变方可判定为阴性结果。推荐使用阴性对照。
垂直握住拭子管,从标签观察窗查看培养基颜色,并与标签上的比色表进行比对。如果在 37°C 条件下培养 24–48 小时,颜色从紫色变为亮黄色,样品则初步判定为沙门氏菌阳性。
请参见表 1。样品培养 48 小时后颜色无改变方可判定为阴性结果。推荐使用阴性对照。
注意:只能以培养基的颜色变化来判定结果!拭子的颜色变化可以忽略不计。只有培养基呈亮黄色时才可判为沙门氏菌阳性结果。
确认:
初步结果为阳性的样本可通过接种在常用的沙门氏菌琼脂平板上或者其它公认的鉴别程序予以确认。后续还可通过生化、免疫学或分子生物学方法对选择性琼脂平板上生长的的典型沙门氏菌菌落做进一步分析。
在许多沙门氏菌检测中(包括 InSite 沙门氏菌 拭子检测),某些菌种如柠檬酸杆菌和大肠杆菌等有可能会出现假阳性结果。
储存条件及有效期:
保存在 2 – 8 °C (35 – 46 °F)
请检查标签上的有效期
废品处理:
处理前请消毒。可通过高压灭菌法、焚烧或在 20% 的漂白剂中浸泡 1 小时来对 InSite 拭子进行消毒。然后可将其丢入垃圾桶。也可直接将InSite 拭子丢弃在生物危害垃圾处理设施中。
安全注意事项:
若正确使用,InSite 拭子的内部成分不会构成任何健康威胁。已确认阳 性结果的拭子可能会存在生物危害,需要按照《良好实验室规范》和 〝健康和安全条例〞进行安全处置。沙门氏菌是一种危险的人类病原 体。在操作可能含有沙门氏菌(初步判定阳性的试管)的样品时,对增菌过的样品务必小心对待。